Hepatiidi C kvalitatiivne analüüs

Jäta kommentaar 9 080

Polümeraasi ahelreaktsiooni kvalitatiivne analüüs - C-hepatiidi PCR-i määramine määrab kindlaks HCV olemasolu või puudumise organismis. Laboratoorsetes tingimustes uuritakse RNA struktuuri, mis sisaldab viirust. Kui viirus C avastatakse, on vajalik ravikuur, sest maksmata jäetud seisund põhjustab tõsiseid tagajärgi. Kõrgekvaliteetne PCR viiakse läbi ka pärast taastumist, et kinnitada antikehade puudumist. Määratud tavapäraseks kontrollimiseks. PCR (kvalitatiivne), mis põhjustab vereseerumis madalat kontsentratsiooni, ei pruugi midagi tuvastada, kuna diagnostilise süsteemil on oma tundlikkuse piirväärtused. Haiguse esialgse või kerge vormi korral viiakse PCR ultra-diagnostika läbi ultra-tundlikes seadmetes.

Mis on RNA viirus?

C-hepatiidi viiruse (või C-hepatiidi viiruse RNA) termin RNA on maksahaigus ise. Viirus C seostub organismi tervete rakkudega sissetungimise kaudu. Aja jooksul levib kogu keha, on vaja ainult sattuda verdesse. Selle tulemusel tungib patogeen maksa sisse, kaitseb selle rakke ja teeb kõvasti tööd. Maksa rakud (hepatotsüüdid) töötavad selle mõju all, muutuvad ja sellest surevad nad. Mida kauem on viirus C maksas, seda suurem on rakkude arv. Aja jooksul arendada ohtlikke haigusi, mis põhjustavad pahaloomulise degeneratsiooni ja surma.

Maksa infektsioon selle tüüpi viirusega ei pruugi ilmneda väljastpoolt. Paljude aastate või aastakümnete vältel tunneb nakatunud inimene täiesti tervislikku seisundit ja sagedamini näitab patoloogiat ainult juhusliku uurimisega. Hepatiidi veres annetamisel uuritakse osa inimese RNA (ribonukleiinhappe) ahelast, mis on inimese geeni osa (DNA). Laboratoorsete uuringute tulemusi ei tohiks kasutada enesehoolduseks, sest see on ainult näitaja. Täpne pilt ja edasine diagnoos määrab paremini kindlaks arst.

Kui see on valmis: teadustöö näited

HCV kinnitamisel viiakse läbi PCR analüüs (polümeraasi ahelreaktsioon). PCR-uuringud aitavad patogeenset materjali leida RNA struktuuris ja määrata tõhus ravi. Nimetatud järgmistel juhtudel:

  • maksa põletiku tunnuste avastamine;
  • profülaktika uuringud ennetamiseks;
  • kokkupuutuvate inimeste uurimine;
  • segapärase hepatiidi diagnoos (peamise patogeeni kindlaksmääramine);
  • viiruse paljunemisvõime taseme kindlaksmääramine kroonilises vormis;
  • maksa tsirroos;
  • et määrata ettenähtud ravi tõhusus.
Hepatiidi raviskeemi efektiivsuse määramiseks määrab arst kindlaks PCR uuringud.

PCR-i kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs on olemas. Kvantitatiivne PCR näitab RNA protsentuaalset suhet viiruse kandjate hulka veres ja kvalitatiivne viiruse olemasolu või puudumine. Kvalitatiivne positiivne näitaja (C-hepatiidi RNA olemasolu) vajab ka kvantitatiivseid uuringuid. Hepatiidi põhjustava toimeaine kõrge kontsentratsioon seondub selle ülekandumise riskiga, teiste nakatamisega. Madal arv on paremini ravitav. RNA viiruste hulk veres ei ole seotud haiguse intensiivsusega. PCR-analüüs tehakse ka interferoonravi puhul, et määrata ravikuuri kestus ja keerukus.

Hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-analüüsi omadused

Polümeraasi ahelreaktsiooni indeksiga kvalitatiivne analüüs määratakse kõikidele patsientidele, kellel on veres C-hepatiidi antikehad. Haigestunud ja taastunud isikud peavad katse uuesti proovima. Soovitatav on läbida B-hepatiidi test, siis positiivse järelduse korral ja hepatiit D. Samuti tuleks kvalitatiivselt analüüsitud reaktsioon viia läbi koos teiste vereanalüüsidega. Analüüsid näitavad täielikku pilti viiruse levikust.

Katsetulemustest nähtub, et ainult C-hepatiidi positiivne test on nähtav või negatiivne, see tähendab viiruse olemasolu või puudumine. Kui väljund on "tuvastatud", siis viirus on ja on endiselt aktiivne. Nimetus "ei tuvastata" tähistab viiruse või selle väikese koguse puudumist. Selle indikaatoriga tuleks meeles pidada, et diagnostiliste süsteemide analüütiline tundlikkus on erinev ja et RNA hepatiit C võib ikkagi veres olla, kuid ei avaldu analüüsis.

Eriti tundlik PCR-meetod ultrahepatiit C avaldub isegi vähesel määral. Kasutatakse fluorestsentsi hübridisatsiooni uuringut, mis on mitu korda kõrgem kui tavalised PCR-süsteemid. Seda meetodit kasutatakse mitmel juhul:

  • kahtlustatud peidetud C-hepatiidi vormid;
  • PCR-diagnostika ei kinnita patogeeni, kuid seal on antikehi;
  • tagasinõudmise korral;
  • varajase nakkuse tuvastamiseks.
Tagasi sisukorra juurde

Dekodeerimisanalüüs

HCV dekodeerimine PCR-iga mõjutab lõplikku otsust diagnoosi andmisel eelkõige ultrametodmeetodil. Selle uuringu peamine puudus on proovi ja materjalide steriilsete tingimuste rangelt kinnipidamine. Väike kõrvalekalle mõnikord annab ebaõigeid analüütilisi järeldusi, raskendab diagnoosi ja järgnevat ravi. Hepatiidi RNA määramiseks PCR-i analüüs ei pruugi alati kindlalt näidata haiguse pilti, mõnikord on mõnikord ebatäpsed ja mõlemas suunas.

Hepatiidi viiruse diagnoosimisel soovitatakse kasutada terviklikku uuringut.

Näitajate norm

Polümeraasi ahelreaktsiooni analüüsi puhul peetakse uuringu tulemuste kohaselt viiruse hepatiit C JgM antikehade puudumist. Samal ajal näitavad seroloogilise analüüsi tulemused, et C-viiruse antikehade esinemine on samuti normaalne. Kvalitatiivne määratlus ei näita haiguse intensiivsust, see näitab ainult R-hepatiidi C põhjustatud agensit. Seda analüüsi korratakse pärast ravi, et kinnitada tegelikku taastumist.

Kõrvalekalded

Kui JgM antikehad esinevad HCV RNA-le, siis see viitab arenevale infektsioonile. Samaaegselt haigus jätkub ägedalt või krooniliselt, avaldub erinevates etappides. Kui antikehade arvu vähenemist registreeritakse, näitab analüüs, et ravitulemused saadi taastumise ajal. Diagnoosides leitakse ainult väga haruldasi valepositiivseid juhtumeid. Neid leidub naistel raseduse ajal ja teiste nakkushaigustega inimestel.

Vereproovide ja C-hepatiidi PCR-i maksumus

C-hepatiit on põletikuline patoloogia, mille puhul mõjutavad maksarakud. Haigus areneb C-hepatiidi viiruse (HVC) tungimise tagajärjel inimese kehasse.

Haiguse vorm võib olla äge või krooniline.

Enamikul patsientidel esineb sageli patoloogia ägeda vormi sümptomeid, mõnikord kaasneb haigusega ka valulikud aistingud kõhupiirkonnas, vähenenud toime, väsimus, isutus, uriini tumedat tooni, väljaheidete värvuse muutumist, naha ja limaskestade kollasus, lihasevalu. Sellised sümptomid ilmnevad tavaliselt 6-8 nädalat pärast nakatumist, kuid võivad ilmneda kuue kuu pärast.

Selliste nähtuste kujunemisega on vaja pöörduda meditsiiniasutuse poole ja läbi kogu organismi põhjalikult uurida. Arstliku läbivaatuse osana tehakse C-hepatiidi vereanalüüs.

Tänapäeva diagnostiliste meetodite abil saab seda patoloogiat kindlaks teha esialgses arengujärgus, mis suurendab oluliselt haiguse täieliku ravivõtmise võimalusi.

Hepatiidi C testimiseks on vaja järgmisi inimesi:

  • naised lapse kandmise ajal;
  • hepatiidi sümptomitega isikud;
  • meditsiinitöötajad;
  • potentsiaalsed organid ja vere doonorid;
  • uimastisõltlased, HIV-nakkusega inimesed, loitsuline intiimne elu.

Nõutavate uuringute loetelu

Milliseid katseid peaksin C-hepatiidi puhul võtma? Selle haiguse täpsuse diagnoosimiseks, selle põhjuste kindlaksmääramiseks ja maksa parenhüümi seisundi määramiseks on vajalikud järgmised uuringud:

  • üldine uriin ja vereanalüüsid;
  • vere biokeemiline analüüs;
  • PCR analüüs;
  • vereanalüüs HVC antikehade tuvastamiseks;
  • olemasolevate oma maksarakkude antikehade vereanalüüs;
  • maksa biopsia.

C-hepatiidi vereanalüüside dekodeerimist teostab spetsialist. Mõelge iga uurimismeetodi üksikasjalikumalt, samuti mõistame, milline hepatiit C analüüs on kõige täpsem.

Üldanalüüs

Hepatiit C üldise vereanalüüsi läbiviimisel saate hinnata patsiendi seisundit. Vere parameetrite muutusi ei peeta hepatiidi spetsiifilisteks sümptomiteks, kuid selle haigusega on selliseid häireid nagu:

  • hemoglobiini, trombotsüütide ja leukotsüütide väiksem kontsentratsioon;
  • suurendab lümfotsüütide sisaldust;
  • vere hüübimist rikutakse;
  • erütrotsüütide settimise määr (ESR) suureneb.

Uriini üldanalüüs võimaldab oma koostises tuvastada urobelini - sapipiget, mis tekib uriinis maksatalitluse häire tõttu.

Biokeemiline analüüs

Vere biokeemiline analüüs hepatiit C võimaldab tuvastada selliseid häireid nagu:

  • maksaensüümide aktiivsuse tõus (alaniini transaminaas - ALAT ja aspartaataminotransferaas - AST), mis sisenevad verd, kui hepatotsüüdid on kahjustatud. Normaalses seisundis ei tohiks neid näitajaid meeste puhul rohkem kui 37 RÜ / l, naiste puhul - mitte üle 31 RÜ / l. ALT ja ASAT suurenenud kontsentratsioon asümptomaatilisel hepatiit C on sageli ainuke selle haiguse sümptom. Lisaks suureneb vere glutamüültranspeptidaasi aluselise fosfataasi sisaldus (tavaliselt mitte üle 150 RÜ / l).
  • ületab bilirubiinisisaldust (nii üldist kui ka otsest) veres. Kui kollase pigmendi sisaldus seerumis ületab 27-34 μmol / l, tekib ikterus (kerge kuni 80 μmol / l, 86-169 μmol / l - mõõdukas, üle 170 μmol / l - raske kujul).
  • Albumiini tase on langetatud, vastupidi, gamma-globuliinide kontsentratsioon suureneb. Gamma-globuliinid koosnevad immunoglobuliinidest - antikehadest, mis kaitsevad keha haigustekitajaid põhjustavate ainete eest.
  • triglütseriidide kontsentratsioon veres.

PCR-test

PCR-tehnika abil on võimalik diagnoosida haiguse põhjustaja. Selle analüüsi teostamine võimaldab tuvastada viirust veres, isegi kui selle kogus on minimaalne. C-hepatiidi PCR-analüüs võimaldab olemasoleva infektsiooni verd määrata juba 5 päeva pärast infektsiooni hetkest, see on ammu enne antikehade ilmnemist.

Kui C-hepatiidi vereanalüüsi tulemus PCR-ga on positiivne, siis näitab see aktiivse infektsiooni esinemist organismis. Selle meetodi abil saate läbi viia HVC RNA kvalitatiivse ja kvantitatiivse uuringu.

C-hepatiidi PCR-i kvalitatiivse analüüsi käigus on võimalik inimese kehas olemasolevat viirust tuvastada.

See diagnoosimisprotseduur viiakse läbi, kui anti-HVC veres leitakse.

Hepatiit C analüüsi lahutamine sisaldab teavet selle kohta, et infektsioon on kas organismis avastatud või tuvastatud. Tavaliselt ei leita veres patoloogilisi aineid.

Kui C-hepatiidi test on positiivne, tähendab see, et patogeen liigub pidevalt ja nakatab maksa rakke.

Selle analüüsi tulemused võivad olla ebausaldusväärsed, see on võimalik järgmistel juhtudel:

  • kasutatud saastunud biomaterjal;
  • hepariini olemasolul veres;
  • uuritava biomaterjaliga keemiliste või valguliste ainete (inhibiitorite) juuresolekul, mis mõjutavad PCR elemente.

C-hepatiidi kvantitatiivne analüüs annab teavet veres sisalduva viiruse hulga kohta, mis määrab kindlaks viiruse koormuse. Selle mõiste all mõeldakse veres sisalduva HVC RNA kogust (näiteks 1 ml). Hepatiit C kvantitatiivse analüüsi tõlgendamisel väljendatakse seda väärtust digitaalses ekvivalendis, mõõdetuna IU / ml kohta.

Enne terapeutilisi meetmeid tuleb võtta C-hepatiidi PCR-vere jaoks. Pärast analüüsi teostatakse 1, 4, 12 ja 24 nädala jooksul. 12. nädala uuring on soovituslik ja viiakse läbi, et hinnata meditsiiniliste protseduuride tõhusust.

Kui C-hepatiidi uuring raseduse ajal on positiivne ja viiruse koormuse väärtused on ületatud, suureneb patogeensete haigustekitajate ülekandumise oht lastel lapsel mitu korda. Ka viiruse koormuse suurenenud väärtuste korral on terapeutiliste meetmete rakendamine keeruline.

Vastavalt hepatiit C testide ärakirjale, kui viiruse koormuse väärtused ületavad 800 000 RÜ / ml, on see kõrge. Kui arvud on alla 400 000 RÜ / ml, peetakse viiruskoormuse taset madalaks.

Hepatiidi C analüüsi PCR-ga peetakse kõige täpsemaks ja sellel on mitmeid eeliseid teiste uurimisvõimaluste suhtes, nimelt:

  • haigusjuhtumi otsene diagnoosimine. Traditsiooniliste uuringute läbiviimisel määratakse kindlaks valgu markerid, mis on patogeenide jäätmed. See näitab ainult seda, et infektsioon esineb veres. Kui hepatiit C testib PCR abil, on võimalik kindlaks teha ohtliku patoloogia patogeeni tüüp.
  • tehnika eripära. Selle protseduuri käigus määratakse ainulaadne DNA piirkond biomaterjalis, mis vastab ainult ühele patogeeni tüübile. See vähendab võltsitud tulemuste tõenäosust.
  • kõrge tundlikkus. PCR-analüüsi tegemisel saate tuvastada minimaalse arvu viiruse. See on tähtis, kui tuvastatakse tingimuslikult patogeensed ained, mis kujutavad ohtu ainult siis, kui nende tase tõuseb.
  • Selle meetodi kasutamisel ühes biomaterjali proovis saab korraga tuvastada mitut patogeeni.
  • saab avastada peidetud nakkusi. Analüüs võimaldab teil lisaks diagnoosida patogeenseid mikroorganisme, mis elavad rakkudes ja on kõrge antigeense varieeruvusega.

Kui testi tulemused on positiivsed, leitakse viiruse jäljed biomaterjalis, siis on võrgus olemas infektsioon kehas.

Hepatiidi C negatiivne PCR-analüüs tähendab, et biomaterjalis pole nakkuse jälgi.

Immunoloogiline uuring

See meetod võimaldab teil tuvastada kõikide hepatiidi viiruse tüüpide antikehad, samuti antikehad teie organismi maksa rakkudele, mille välimus aitab kaasa autoimmuunse hepatiidi tekkimisele.

Uuringu käigus saadud tulemused on asjakohased 3 kuud, siis peaksite hepatiidi C jaoks veri üle andma.

Samuti on võimalik läbi viia ekspress-uuring spetsiifiliste testribadega. See analüüs võimaldab määrata viiruse C antikehi vere ja sülje koostises. Seda protseduuri saab teostada iseseisvalt kodus.

Maksa biopsia

Sellise analüüsi teostamiseks võetakse osa maksa parenhüümi ja tehakse saadud biomaterjali histoloogiline uurimine. See võimaldab teil hinnata keha seisundit: tuvastada põletikulised, nekrootilised fookused, fibroosi staadium ja nii edasi.

Praegu kasutatakse hepatiidist parenhüümi histoloogilise analüüsi asemel tehtavaid katseid.

Maksakahjustuse staadiumi ja põletikuprotsessi intensiivsuse hindamiseks kasutatakse spetsiaalseid venoosset vere biomarkereid. FibroTest'i abil saate hinnata kiudude koe kasvu taset.

Actinest'i täitmisel saate teavet patoloogiliste protsesside intensiivsuse kohta maksa parenhüümil. Steatototesta kasutamine võib diagnoosida maksa rasvkoe ja hinnata selle protsessi ulatust. Fibromax koosneb kõigist ülaltoodud testidest ja võib hõlmata ka teisi uuringuid.

Uuringu ettevalmistamine

Millised testid on tehtud hepatiit C kohta ja kuidas oleme seda või seda tüüpi teadustööd leidnud? Samuti on oluline teada, kuidas analüüsimiseks ette valmistuda.

Usaldusväärsete tulemuste saamiseks on soovitatav järgida järgmisi nõudeid:

  • Hepatiit C testid tuleb võtta tühja kõhuga hommikul. Viimast korda tuleks toitu tarbida vähemalt 8 tundi enne uuringut.
  • Biomaterjali võib koguda päevaajal või õhtul. Sellisel juhul on oluline, et viimase söögikorra ja analüüsi vahele jääks vähemalt 5-6 tundi.
  • Enne hepatiit C annuse andmist tuleb tee, kohv, mahl või muud jookud ära visata, lubatud on ainult vesi.
  • 48 tundi enne uuringut on vaja välja jätta rasvade, praetud ja alkoholit sisaldavate jookide kasutamine.
  • vähemalt tund enne analüüsi, peate hoiduma suitsetamisest.
  • analüüsi ei tohiks teha kohe pärast ultraheli-, instrumentaal-, röntgenuuringut, massaaži või füsioteraapiat.
  • üks päev enne uuringu läbiviimist peab ravimite ja intensiivse füüsilise tegevuse kasutamine välja jätma. Emotsionaalne stress on vastunäidustatud.
  • Soovitatav on kulutada 15 minutit enne uuringu läbimist rahulikus olekus.

Vere kogumise protseduuri läbiviimine

Kust testitakse C-hepatiidi vastu? Biomaterjalide proovide võtmine edasistes uuringutes viiakse läbi meditsiiniasutuse laboris või patsiendi kodus.

Veeni vere võetakse järgmiselt:

  • Patsiendi küünarvarre ümbritsetud spetsiaalse jalutuskäigu abil peatatakse venoosne verevool. Tänu sellisele manipuleerimisele veenid täidetakse verest ja on nähtavamad, mis aitab oluliselt nõela sisestamise protsessi.
  • kus nõel sisestatakse, hoolikalt töödeldakse alkoholi või alkoholi sisaldava vedelikuga.
  • Nõel sisestatakse õrnalt veeni, seejärel kinnitatakse sellele katseklaas, mis on spetsiaalselt ette nähtud vere kogumiseks.
  • Vahetult pärast seda, kui nõel on veeni sisestatud, eemaldatakse patsiendi käes pigistatav rakmed.
  • kui analüüsi jaoks vajalik veremahus on kogutud, eemaldatakse nõel veenist ettevaatlikult.
  • Süstekohta tuleb kanda alkoholiga niisutatud steriilne puuvillane tampoon või marli pad.
  • et vältida hematoomide esinemist, tuleb tampoon vajutada mõnevõrra nõela sisestamisala vastu, painutada käe küünarliigendil ja hoida seda selles asendis mitu minutit. Sellised tegevused aitavad ka verd kiiremini peatada.

Kui sisejuhtimise tehnika on hea, on see protseduur täiesti ohutu ega põhjusta valusaid tundeid.

Harvadel juhtudel võivad vere kogunemine paisuda. Seda nähtust nimetatakse "flebiitiks". Probleemide lahendamiseks aitab kokku suruda (mitte kuum), seda tuleks naha piirkondade paistetamiseks kasutada mitu korda päevas.

Teatud probleemid võivad tekkida ka veritsushäire korral. Aspiriini, varfariini ja teiste vere vedeldite võtmine võib põhjustada verejooksu. Seetõttu peab enne analüüsi tegemist keelduma mis tahes ravimi võtmisest. Kui ravi ei saa tühistada, peaksite sellest spetsialisti teavitama.

Kuupäevad ja hinnad

Kui palju on testitud C-hepatiidi suhtes? Hepatiidi vereanalüüsi tulemusi saab valmis mõne tunni ja mõne päeva jooksul (reeglina mitte rohkem kui 8 päeva). Tulemuste ettevalmistamise kestus sõltub viiruse tüübist ja valitud analüüsimeetodist. Kiirem on PCR-meetodiga läbi viidud uuring. Sellisel juhul tulemused on valmis mõne tunni tagant.

Kui palju maksab C-hepatiidi test? Sõltuvalt kliinikusse ja uuringu keerukusest võib protseduuri hind varieeruda 400 kuni 11 000 rubla ulatuses.

Te peate teadma, et HVC antikehade piisava hulga moodustamiseks võib kuluda mitu nädalat. Seetõttu võib patoloogia arengu varases staadiumis uuringu tulemus olla vale-negatiivne.

Lisaks on ebausaldusväärsete andmete saamine võimalikult vähene kvaliteedi analüüs ja saadud biomaterjali transportimise tingimuste rikkumine (proovid tuleb viia laborisse maksimaalselt 2 tundi pärast vereproovide võtmist).

Kui uuringu tulemus on positiivne, peate kohe ühendust võtma nakkushaiguste arstiga. Spetsialist viib läbi täiendava uuringu ja määrab asjakohase ravi.

C-hepatiidi PCR analüüsi läbiviimine ja tulemuste dekodeerimine

Hepatiit C PCR-analüüs on uuring, mille põhieesmärk on põhjustava toimeaine geneetilise materjali tuvastamine. Analüüs näitab haiguse tekitajat polümeraasi ahelreaktsiooni abil. Sellel diagnoosil on kõrge täpsus, spetsiifilisus viirusliku infektsiooni puudumise või olemasolu tuvastamiseks.

Diagnoosi olemus

Teha PCR analüüsiks C-hepatiidi viiruse patsiendil võetakse veeniverd, mis potentsiaalselt sisaldab RNA (ribonukleiinhappe) HCV viirusega taotletakse.

C-hepatiidi PCR-i katse tähendab seda protseduuri, kui patsiendile lisatakse vere osakesi:

  • praimerid (vajaliku geeni lühikesed kunstlikult sünteesitud piirkonnad);
  • eriline ensüüm (RNA polümeraas).

Pärast bioloogilise materjali kogumist saadetakse laboris uurimiseks. Otsest PCR-analüüsi vajab üks osa verest, teine ​​uuringule saadetakse ELISA-meetodiga. Ensüüm suudab lühikese aja jooksul suurendada patogeeni viiruse geneetilise materjali arvu. Spetsiaalses seadmes sooritatakse mitu tsüklit soojus- ja jahutusprotsessides. Viimasel etapil võrreldakse saadud materjali viiruse geenidega ja tehakse järeldus patsiendi organismis patoloogilise seisundi või puudumise kohta.

PCR-analüüsi olemus ja käitumine laboris. Filmitud Siberi meditsiinilaboratoorium.

Uuringute liigid

On olemas 3 diagnostika liiki, mis võimaldavad määrata C-hepatiidi viiruse olemasolu inimese kehas:

  • genotüpiseerimine;
  • kvaliteet;
  • kvantitatiivne.

Kvalitatiivne meetod

Hepatiidi C diagnoosimine kvalitatiivse meetodiga on rakendatav patsientidele, kellel tuvastatakse viiruse antikehad vereanalüüsis. HCV RNA ägeda faasi esinemise korral võimaldavad sellised diagnostilised meetmed määrata haiguse esinemist 1-2 nädala jooksul pärast nakatumist. Selle perioodi jooksul ei pruugi C-hepatiidi antikehad veel areneda.

Kvantitatiivne meetod

Viiruse kontsentratsiooni määramiseks vereproovides kasutatakse kvantitatiivset diagnostilist meetodit. Selline vireemia (kontsentratsiooniaste) test võimaldab täpselt määrata viiruse RNA ühikute arvu. Lõpptulemus väljendatakse vastavas mahus. Kui me räägime kvantitatiivsest analüüsist, siis mõõdetakse näitajaid 1 ml (1 kuup-cm).

Viirusliku koormuse parameeter tähendab haiguse nakkusohtlikkust, see tähendab, et see kajastab patsiendi "nakkavust". Praktikas tähendab see seda, et mida suurem on viiruse kontsentratsioon veres, seda suurem on patsiendi võimalus nakatada teisi C-hepatiidi vastu. Kvantitatiivne uurimismeetod võimaldab teil kindlaks määrata ravi kvaliteedi ja efektiivsuse.

Genotüüpimine

Genotüüpide ilmnemine põhjustab haiguse tekitajat. Enne raviskeemi määramist määratakse kindlaks viiruse genotüüp: ravi kvaliteet ja kestus sõltuvad sellest. Näiteks I-tüüpi haiguse ravis on efektiivsus 60%, II, III tüüpi korral - umbes 80%.

Hepatiidi PCR-analüüsi eelised

Menetluse peamised eelised on:

  1. Varase diagnoosimise võimalus. PCR-analüüs võimaldab tuvastada viiruse olemasolu nakkuse varases staadiumis.
  2. Madala veamääruse tulemused. Uuritud bioloogiline ressurss võimaldab teil diagnoosida ainult ühe viirusliku infektsiooni tüübile iseloomulikku geneetilist materjali. See asjaolu võimaldab vältida valeandmete tulemusi.
  3. Kõrge tundlikkus. PCR-analüüs võimaldab tuvastada RNA-viirust väikestes kogustes, mis võimaldab ka aeg-ajalt jälgida latentseid infektsioone.

Näidustused

Hepatiidi C PCR-i testimine on vajalik, kui see on olemas:

  • kellel on haigete inimestega kokkupuude, mis võib põhjustada nakkust;
  • maksatsirroosi sümptomid (põrna suurenemine, maksa suuruse muutused, veeni põrke avastamine naha alla kõhuõõnes);
  • ELISA positiivsed tulemused;
  • AST ja ALT aktiivsuse suurenemine (väljendub veres biokeemilises analüüsis);
  • vajadus kontrollida viirusevastase ravi käitumist;
  • viirusliku koormuse tekke vajaduse ravi algusjärgus;
  • ravi lõpetamise etapp, et vältida võimalikke kordusi;
  • hepatiit B esinemine patsiendil, et välistada segatüüpi maksakahjustuse tekkimist.

Kuidas valmistuda vereannetamiseks PCR-uuringute jaoks

PCR-analüüsi ettevalmistamine sisaldab järgmisi soovitusi:

  • verd võetakse hommikul;
  • analüüs tehakse tühja kõhuga, seetõttu on soovitatav teha vaheaeg viimast söögikorda 8-10 tundi;
  • paar päeva enne diagnoosi tuleks välja jätta rasvased, vürtsikad ja praetud toidud, alkohoolsed joogid ja suitsetamine;
  • üks päev enne analüüsi tuleks hoiduda raskest füüsilisest koormast, välistada klassid jõusaalis või basseinis.

Analüüsi tulemused: normid ja kõrvalekalded

Analüüs iseenesest pole pikk ja kõrge kvalifikatsiooniga spetsialist hepatoloog või nakkushaiguste spetsialist lahutab PCR-i tulemused hepatiit C vastu. Analüüsi tulemuste põhjal on diagnoositud patsient.

Uuringu tulemuste nõuetekohaseks dešifreerimiseks võetakse arvesse näitajaid

  • vere biokeemiline analüüs;
  • ultraheliandmed;
  • biopsia tulemused.

Kvantitatiivse analüüsi tõlgendamine

PCR kvantitatiivse analüüsi tulemuste saamisel võetakse arvesse järgmisi näitajaid:

Põhilised hepatiit C testid

Viiruse hepatiit C on tõsine meditsiiniline ja sotsiaalne probleem. Tänapäeval kannatab maailmas umbes 180 miljonit inimest, igal aastal sureb 350 000 inimest. Hilise latentse (asümptomaatilise) hepatiidi C käigus on hiline diagnoos. Hepatiidi C analüüs tehakse haiguse diagnoosimiseks, diferentsiaaldiagnoosimiseks, abiga, eelnevalt üleantud haiguse kindlaksmääramiseks "seisab". Uuringut kasutati patsientidel, kellel on C-hepatiidi sümptomid, maksaensüümide aktiivsuse suurenemine, teabe saamine varem üleantud hepatiidi kohta täpsustamata etioloogias, riskirühma kuuluvatel inimestel ja skriininguuringutes.

Hepatiit C diagnoos viiakse läbi kahes etapis:

1. etapp Hepatiit C viiruse (HCV-vastane antikeha) esinemine seerumis.

2. etapp HCV-vastase antikeha olemasolu korral viiakse läbi uuring RNA (ribonukleiinhappe) olemasolu kohta hepatiit C-ga PCR-i abil. Katse võimaldab tuvastada protsessi faasi - "aktiivne / mitteaktiivne", et lahendada ravi vajadus. On teada, et ligikaudu 30% C-hepatiidi viirusega nakatunud inimestest vabanevad nakkusest üksi, sest neil on tugev immuunsüsteem ja nad ei vaja ravi. PCR-i kasutamine määratakse kindlaks viiruse genotüübiga. Erinevad genotüübid reageerivad ravile erinevalt.

Hepatiit C maksakahjustuse määr määratakse biopsia või muude invasiivsete ja mitteinvasiivsete testide (näiteks fibrooste) abil. Maksa steatoosi määra määrab steatosteta. Kõigil juhtudel peaks hepatiit C diagnoos põhinema epidemioloogilise uuringu andmetel, haiguse kliinikus ja biokeemiliste vereanalüüside andmetel.

Joon. 1. viirusliku hepatiidi C tõsine mõju - intensiivne astsiit.

Hepatiit C test: anti-HCV

Anti-HCV antikehad (anti-HCV) on spetsiifilised nakkuse markerid. Haigekoha kehas toodetakse C-hepatiidi viiruse (antigeenid) immunoglobuliinide klassi IgM ja IgG (anti-HCV IgM / IgG) valgud spetsiifilisi antikehi.

Kui C-hepatiidi viiruse antikehade jaoks saadakse positiivne tulemus, tehakse kinnitav test - viiruse struktuursete ja mittestruktuursete valkude täielike antikehade määramine. E1 ja E2 viiruste struktuuri ümbritsevad valgud on toodetud anti-HCV IgM, nukleokapsiidvalgu C-cor (anti-HCV IgG) ja 7 NS-anti HCV NS IgG mittestruktuursete valkude ensüümid.

Hepatiit C viiruse antikehade tuvastamiseks kasutatakse ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA). Kinnitavad testid - RIBA (rekombinantne immunoblottimine), vähemal määral kasutatakse (+) ELISA tulemuste kinnitamiseks Inno-Lia (sünteetiliste peptiidide analüüs).

Anti HCV IgM

  • HCV IgM antikehad ilmuvad seerumis 4-6 nädala jooksul pärast nakatumist ja jõuavad kiiresti maksimumini. Ägeda protsessi lõpus (pärast 5-6 kuud) väheneb nende kontsentratsioon.
  • HCV-vastase IgM-i esinemise pikaajaline registreerimine näitab, et C-hepatiit on omandanud kroonilise ravikuuri.
  • IgM taseme tõus kroonilise hepatiit C perioodil viitab nakkusprotsessi taaskäivitamisele.
  • IgM-i immunoglobuliinide tase võimaldab teil hinnata ravi efektiivsust.

Anti HCV IgG

HCV IgG antikehad ilmnevad patsiendi seerumil 11 kuni 12 nädalat pärast nakatamist. 5-6 kuu jooksul registreeritakse tippkontsentratsioon. Järgmised antikehad

püsib kogu haiguse kestuse ajal püsivas tasemes ägeda perioodi vältel ja taastumisperioodil.

C-hepatiidi viiruse antikehad kokku

Hepatiit C viiruse (anti-HCV kogus) antikehi kasutatakse haiguste "värskete" juhtude diagnoosimiseks. Kogu antikehad on nukleokapsiidi valgu C-kor (anti-HCV IgG) ja 7 mittestruktuurse NS-valgu ensüümid (anti HCV NS IgG) anti-HCV NS3, anti HCV NS4 ja anti HCV NS5 antikehad.

Kogu antikeha C-hepatiidi viiruse kuvatakse vereseerumis infectable pärast 11-12 nädalat algusest infektsioon, saavutades maksimaalsed kuni 5-6 kuu ja säilitati temperatuuril püsivana ajaks haiguse ägedas faasis ja 5-9 aastat pärast taastumise aja.

Igale antikehade tüübile on sõltumatu diagnostilise väärtusega:

  • Anti-HCVC (cor) on C-hepatiidi kontakti peamised indikaatorid.
  • AntiHCVNS3 tuvastas ühe esimese serokonversiooni protsessi (antikehade tootmine vastusena viiruse olemasolule), näitavad nakkusprotsessi raskust ja viitavad kõrgele viiruskoormusele. Nende abiga määratakse pärilik C-hepatiit patsientidel, kellel ei ole kahtlust, et neil on infektsioon. Anti-HCV NS3 prolongeeritus seerumis näitab protsessi kroonilise ohu suurt ohtu.
  • AntiHCVNS4 näitab, et nakkusprotsess on pikk. Antikehade tiitrite taset saab hinnata maksakahjustuse taseme järgi.
  • AntiHCVNS5 näitab viirusliku RNA olemasolu. Nende avastamine ägeda perioodi jooksul on kroonilise protsessi eelkäija. Ravi taustal on kõrgete antikehade tiitrid, mis viitavad sellele, et patsient ei reageeri ravile.
  • AntiHVVNS4 ja antiHVVNS5. Seda tüüpi antikehad ilmnevad hepatiidi arengu hilises staadiumis. Nende vähenemine viitab nakkusprotsessi remissiooni kujunemisele. Pärast ravi on anti-HCV NS4 ja anti-HCV NS5 tiitrid 8... 10 aasta jooksul vähendatud. Seda tüüpi antikeha ei kaitse uuesti rekombinatsiooni eest.

Joon. 2. Maksa rasvhape. Maksatsirroos hepatiit C.

C-hepatiidi dekodeerimise analüüs

C-hepatiidi viiruse antikehade puudumist tähistab termin "Norm". Kuid see ei tähenda alati haiguse puudumist inimestel. Seega antikehade puudumine nakatunud inimese veres registreeritakse kuni nende ilmumiseni veres - kuni 6 kuud nakkuse hetkest (keskmiselt 12 nädalat). Antikehade puudumise perioodi nakatunud inimese veres kutsutakse "seroloogiliseks aknaks". Kolmanda põlvkonna katsesüsteemidel (ELISA-3) on kõrge spetsiifilisus (kuni 99,7%). Umbes 0,3% moodustas valepositiivseid tulemusi.

Anti-HCV esinemine viitab praegusele infektsioonile või mineviku infektsioonile.

  • IgM antikehade ja anti-HCV Cor Cor IgG tuvastamine, anti HCV CorE IgG ja (+) PCR-i tiitrimiste tulemuseks on ägeda hepatiidi kliiniliste ja laboratoorsete näitajate esinemine, mis näitavad haiguse ägedat perioodi.
  • Anti-IgM, anti-HCV CorE IgG, anti-HCV NS IgG ja (+) PCR tuvastamine põhjustab hepatiidi kliiniliste ja laboratoorsete nähtuste esinemist, näitab kroonilise hepatiit C reaktivatsiooni.
  • Anti-HCV Coré IgG ja anti-HCV NS IgG tuvastamine kliiniliste ja laboratoorsete hepatiidi sümptomite puudumisel ja negatiivne PCR-i tulemus näitab, et patsiendil on varjatud faasis krooniline hepatiit.

Joon. 3. Maksa rasvhape. Primaarne maksavähk. Onkoloogia arengu üheks põhjuseks on maksa tsirroos, mis on välja töötatud kroonilise hepatiit C taustal.

C-hepatiidi PCR analüüs

Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR) on "viielülitava hepatiidi C diagnoosimiseks" "kuldne standard". Katse kõrge tundlikkus võimaldab avastada viiruste (RNA) geneetiline materjal isegi siis, kui uuritavas materjalis on vaid mõned neist. PCR on suuteline tuvastama RNA-viiruseid ammu enne antikehade ilmnemist seerumis, kuid mitte varem kui 5. päeval infektsiooni hetkest. Kui haigus tuvastatakse PCR abil, tuvastatakse RNA viirused mitte ainult seerumis, vaid ka maksa biopatides.

  • Polümeraasi ahelreaktsioon võimaldab määrata C-hepatiidi viiruste esinemist või puudumist veres ja otsustada ravi alustamise üle. On teada, et kuni 30% patsientidest vabanevad infektsioon ise, sest neil on tugev immuunsüsteem ja nad ei vaja ravi.
  • Hepatiit C PCR-i kasutatakse ravi efektiivsuse jälgimiseks.
  • PCR-i kasutatakse antikehade puudumisel veres, kuid C-hepatiidi tugevate kahtluste korral (leelisfosfataasi, üldbilirubiini, maksaensüümide AST ja ALT üle 2 korra).
  • Hepatiidi C PCR-analüüsi kasutatakse hepatiidi viiruste emakasiseseks ülekandmiseks.

C-hepatiit viiruskoormus

PCR-analüüsi abil on võimalik määrata viiruse RNA olemasolu veres - kvalitatiivne analüüs (tuvastatud / mitte tuvastatud), kuid nende arv - viiruse koormus (viiruse RNA ühikute arv 1 ml veres). Kvantitatiivse näitaja PCR-i kasutatakse hepatiit C ravi tõhususe jälgimiseks.

PCR-i jaoks kasutatavad meetodid on erineva tundlikkusega. Vene Föderatsioonis on 2014. aasta metodoloogiliste soovituste kohaselt soovitatav kasutada meetodeid, mille tundlikkus on 25 RÜ / ml või vähem. Vastavalt 2015. aasta Euroopa Maksuuuringute Assotsiatsiooni soovitustele tehakse ettepanek kasutada viiruse RNA määramiseks meetodeid, mille tundlikkus on 15 RÜ / ml või vähem.

Sõltuvalt katsesüsteemi tundlikkusest saab patsient uuringu ühe või teise tulemuse:

  • COBAS AMPLICORi analüsaatori minimaalne tundlikkus on 600 IU / ml (vana põlvkonna analüsaator).
  • HCB-TEST COBAS AMPLICOR analüsaatori minimaalne tundlikkus on 50 IU / ml, mis on 100 koopiat milliliitri kohta.
  • HCV RealBest RNA analüsaatori minimaalne tundlikkus on 15 RÜ / ml, mis on 38 koopiat milliliitris (kaasaegsete katsesüsteemide rühmas). Analüsaatorite spetsiifilisus on 100%. Nende abiga tuvastatakse C-hepatiidi viiruste alatüüpide 1a ja 1b, 2a, 2b, 2c ja 2i, 3, 4, 5a ja 6 RNA-d.

Kui analüsaatori tundlikkuse läve kohta on olemas RNA koopiaid, saab patsient vastuse "ei tuvastata".

Joon. 4. PCR analüüsi näide (kvantitatiivne test). Viiruskoormus määratakse kindlaks hepatiit C kohta.

C-hepatiidi PCR-analüüsi tulemuste tõlgendamine

  • RNA viiruse puudumine viitab nakkuse puudumisele.
  • RNA puudumine antikehade esinemise vastu veres viitab C-hepatiidi viiruse kadumisele ravitava või eneses paranemise mõjul.
  • Mõnedel juhtudel esineb viirus veres, kuid allhangete tasemel, kui analüsaator ei suuda selle kontsentratsiooni haarata. Sellised patsiendid on infektsioonide seisukohast ohtlikud.
  • RNA viiruse tuvastamine 6 järjestikuse kuu jooksul ägeda hepatiit C-ga patsientidel näitab, et haigus on krooniline.
  • Viiruse RNA vähendamine ravi ajal näitab ravi efektiivsust ja vastupidi.

Joon. 5. rasvane hepatoos. Maksakahjustuse üks põhjus on viirushepatiit C.

Hepatiit C põhilised biokeemilised vereanalüüsid

Biokeemilised vereanalüüsid aitavad kindlaks määrata paljude inimorganite ja -süsteemide funktsionaalset seisundit.

Maksaensüümide ALT ja AST ensüümid

Maksaensüümid sünteesitakse rakusisesetena. Need on seotud aminohapete sünteesiga. Suur osa neist leitakse maksa, südame, neerude ja skeletilihaste rakkudes. Elundite katkestamisega (rakumembraanide terviklikkuse rikkumine) sisenevad ensüümid verdesse, kus nende tase tõuseb. Suurenenud ensüümide tase registreeritakse maksarakkude lüüsi (hävitamine), müokardi infarkti ja muude haiguste korral. Mida suurem on transaminaaside tase seerumis, seda rohkem rakke häviti. ALT ületab maksa rakke, AST - müokardirakkudes. Maksarakkude hävitamisega tõuseb ALT tase 1,5-2 korda. Müokardiarakkude hävitamisega suureneb AST tase 8-10 korda.

Kroonilise viirusliku hepatiidi diagnoosimisel tuleb pöörata tähelepanu ASAT / ALT suhe (de Ritisi koefitsient). AST ületav üle ALAT-i näitab maksarakkude kahjustust.

  • AST norm meestele on kuni 41 ühikut / l, naised - kuni 35 ühikut / l, üle 12-aastased lapsed - kuni 45 ühikut / l.
  • ALT norm meestele on kuni 45 ühikut / l, naised - kuni 34 ühikut / l, 12-aastased ja vanemad lapsed - kuni 39 ühikut / l.
  • Tavaliselt (tervetel inimestel) on AST / ALT suhe 0,91-1,75.

Bilirubin

Bilirubiin on hemoglobiinisisaldus. Bilirubiini sisaldus veres on kaudne (kuni 96%) ja otsene (4%). Selle aine lagunemise protsess toimub peamiselt maksa rakkudes, kus see organismist eritub sapiga. Maksa rakkude hävitamisega suureneb bilirubiini tase seerumis. Tavaliselt on kogu bilirubiinisisaldus alla 3,4 - 21,0 μmol / L. Bilirubiin tase 30-35 μmol / l ja üle selle kudedesse, mille tõttu nahk ja sclera muutuvad maitseeks.

Joon. 6. Kui veresuhkru C sisaldus veres suurendab bilirubiini taset. Aine tungib kudedesse, mistõttu nahk ja sclera muutuvad maitseeks.

C-hepatiidi PCR-diagnostika

C-hepatiit on maksarakkude põletik, mis tekib HCV-viiruse (hepatiit C) nakatumise tõttu nakatunud isiku verest. Flaviviiruse HCV geneetiline kood viiakse läbi viiruse struktuuris sisalduva RNA (ribonukleenhape) molekuli abil. See eluohtlik nähtus eristub salajasena patoloogia algfaasis. Infektsiooni ja sümptomite ilmnemise vaheline ajavahemik (immuunsüsteemi vastus) võib olla üks kuu kuni kuus kuud. Tavaliselt on haigus krooniline ja seda on raske ravida.

Kaasaegne meditsiin võimaldab diagnoosida vähese maksakahjustusega patoloogiat. Kõige sagedasemad ja tõhusamad diagnostilised meetodid hõlmavad PCR-analüüsi. Mõtle käesolevas artiklis, mis see on ja millised seda on olemas.

Mis on uuring?

C-hepatiidi PCR-analüüs on laboratoorsed uuringud, mis tuvastab ribonukleentsiinhappe (RNA) geneetilise materjali flaviruumi. See määrab veres olevate RNA molekulide arvu, bioloogilise materjali kvaliteedi, HCV flaviiruse geneetilise tüübi.

C-hepatiidi PCR-meetod võimaldab enne flukaviiruse moodustumist enne antikehade moodustumist tuvastada varsti pärast infektsiooni.

Uuringut nimetatakse sageli RNA analüüsiks, kuna see tuvastab flavaviiruses sisalduvate ribonukleiinhappeosakeste suuruse 30-60 nm.

Uuring viiakse läbi järgmiselt: tühja kõhuga annab patsient veenist verd, mida seejärel testitakse erinevate meetoditega:

  • Reaalajaline PCR viiakse läbi suletud automatiseeritud viisil ja selle alumine piir on RNA viiruste tuvastamiseks 15 RÜ / ml;
  • COBAS AMPLICOR tundlikkusega 50-100 RÜ / ml.

Mida kõrgem on diagnoosimeetodi tundlikkuse künnis, seda suurem on uuritavas bioloogilises materjalis väikseima viiruse sisalduse avastamise võimalus.

Milliseid analüüse kasutatakse

Analüüs, mida on juba mitu aastakümmet edukalt kasutatud, nimetatakse PCR-hepatiidiks ning seda saab tuvastada üsna lihtsalt ja kiiresti. Meditsiinis on kaks reaktsioonimeetodit, mis on põhimõtteliselt üksteisest erinevad:

  • kvalitatiivne meetod näitab konkreetse viiruse geneetilise allika olemasolu bioloogilistes materjalides;
  • kvantitatiivne analüüs mõõdab geneetilise aine arvu, mis võimaldab kindlaks teha patoloogia faasi või hinnata terapeutilise kulgu efektiivsust;
  • genotüpiseerimine määrab kehas esineva viiruse tüübi.

Üldiselt aitab vereanalüüs kindlaks vireemia ja patogeeni geneetiline tüüp. Reeglina viiakse uuring läbi ühe korra, sõltuvalt diagnostilise süsteemi tundlikkuse astmest. Vajaduse korral viiakse uuesti läbi ultral sensitsioneeritud reagent.

Kvaliteetne PCR

Mis on hepatiit C kõrge kvaliteediga PCR-RNA? Reaktsiooni olemus seisneb hepatiidi RNA järjestuse esinemises ja reaktsioon on võimalik ainult ELISA-ga sarnase etimoloogiaga viirusvalkude esinemise korral. Võrdlusprotsessis tuvastatakse maksa piirkonna koormus ja võimalikud kahjustused.

Selle meetodi eripära on võime tuvastada isegi eraldi geeni kohalolekut.

Tuleb märkida, et pärast PCR ja ELISA testi tulemuste saamist vajab patsient sobivat ravi, sõltumata sellest, milline oli viimane ensüümi immunoloogiline analüüs. Positiivne näitab infektsiooni ja PCR negatiivne näitab viiruse osakeste arvu vähenemist tundlikkuse taseme suhtes.

Negatiivse PCR-i ja ELISA tootmise tagajärjel on mitmeid tingimusi:

  • materjali kogumise nõuetekohaste tingimuste puudumine;
  • saadud analüüs sisaldab saastumist;
  • patsiendi varajase hepariini süstimise korral.

Patsientide jaoks ei ole vaja PCR-analüüsi jaoks vereproovide võtmise teatud eeskirju järgida, sel juhul sõltub selle analüüsi kvaliteet meditsiinitööstusest, kes sooritab protseduuri. Võimalus tuvastada haiguse esinemine (eriti ägeda kujuga) ilmneb mõne nädala jooksul pärast nakatumist.

Kvantitatiivne analüüs

Kvantitatiivne test on soovitatav viiruse koormuse tuvastamiseks vahetult enne täiendava ravi tekkimist ja keha reaktsiooni. Vereproovide võtmine toimub sarnaselt kõrgekvaliteedilise PCR ja ELISA-ga, ainus tingimus on patsiendi suitsetamise võimaluse puudumine enne protseduuri.

Uuringu tulemusel saadud andmete eripära järgi on suurenenud koormust iseloomustanud näitajad 800000 RÜ / ml, madal - 400000 RÜ / ml. Viiruse esinemine patsiendi kehas on näidustatud hepatiidi PCR-iga, ei ole negatiivne kvalitatiivne test.

Sellised uuringud võimaldavad kindlaks teha, kui patsiendi ohtlikkus ümbritsevatele inimestele on ohtlik. Näiteks kõrge taseme tuvastamine viitab patsiendi suurenenud nakkavusele. Lisaks sellele aitab analüüsi tulemused välja töötada veelgi tõhusaim ravi ja määrata, kui palju olemasolevat ravi peetakse efektiivseks.

Katsete kiire negatiivne reaktsioon näitab valitud tehnika edukust ja aeglane näitab vajadust kohandada ja mitmekesist ravi kasutada.

Analüüsi protseduuri võtmise protsess sõltub haiguse konkreetsest päevast. Esimene määramine toimub esimesel päeval pärast patsiendi haiglasse sisenemist, seejärel korratakse seda protseduuri 4, 12 ja 24 nädala jooksul pärast ravimite võtmist.

Seega näitab kvantitatiivne analüüs, milline ravi on kõige tõhusam, olemasoleva ravi kestus ja patsiendi oht teiste inimeste suhtes.

Genotüüpimine

Materjalianalüüsi uuringus on oluline kindlaks teha viiruse genotüübi täpsus. Praegu on C-hepatiidi viirusega 11 erinevat sorti, mis omakorda hõlmavad teatavaid alamliike.

Kõik need liigid reageerivad erinevalt erinevatele ravimeetoditele ja üksikute liikide suhtes on paljud ravimid absoluutselt resistentsed.

Genotüüp võimaldab määrata ja näidata maksa seisundit. Ei ole haruldane, et tulemusi registreeritakse "ei kirjutata", mis tähendab, et see katsesüsteem ei tuvasta viirust patsiendi veres. Seda saab tuvastada, kui konkreetne genotüüp ei vasta sellele tsoonile. Sellises olukorras toimub analüüs korduvalt ja materjali uurimiseks kasutatakse tundlikumat süsteemi.

Ultra tundlik meetod

Ülitundlik meetod on vajalik teatavatel juhtudel, kui hepatiidi diagnoosimist ei saa läbi viia muude meetoditega ja kui patsiendi raviarst määrab kindlaks analüüsi:

  • kui esineb kahtlus C-hepatiidi viiruse suhtes latentse haigusliigiga patsientidel;
  • C-hepatiidi viiruse vastaste antikehade olemasolu, mida PCR-diagnostika ei kinnita;
  • et määrata kindlaks valitud ravimeetodi efektiivsuse kvaliteet ja kinnitada haiguse kõrvaldamine.

Selle meetodi tundlikkus on palju suurem kui tavaliselt kasutatav, kuid see meetod ei välista nii positiivsete kui ka negatiivsete tulemuste saamist. Sellises olukorras on oluline kontrollida menetluse kvaliteeti ja materjali saastumise võimalust.

PCR analüüsi selgitus

Analüüside dekodeerimine viiakse läbi esitatud materjalide põhjal, laboratoorsete uuringute tulemused hõlmavad teatavaid eespool kirjeldatud andmeid.

Dekoodimine võib sisaldada positiivset PCR polümeraasi ahelreaktsiooni ja negatiivset ELISA analüüsi, mis tähendab, et patsiendil ei ole veres C-hepatiidi nähud, kuid varem on ta haiguse ägedat vormi üle kandnud. Tavaliselt kasutatakse spetsialistide diagnoosimisel PCR-i näitajate kasutamist.

Kokkuvõtteks võib järeldada, et analüüsi ajal on oluline järgida kõiki reegleid ja soovitusi, et saadud tulemused oleksid võimalikult täpsed ning saadud andmete alusel oleks võimalik kindlaks määrata kasutatava ravi tõhusus ja täielik taastumine.

C-hepatiidi PCR analüüs

"Kroonilise viirusliku hepatiidi C (CVHS)" diagnoosimiseks on vaja isiku terviklikku uurimist, mis hõlmab kliinilisi, laboratoorseid ja instrumendialaseid uuringuid. Õige diagnoosi diagnoosimise seisukohalt on oluline PCR-meetod - polümeraasi ahelreaktsioon.

Mida see analüüs näitab ja miks see on vajalik?

See laboratoorne meetod tuvastab inimese veres C-hepatiidi viiruse RNA. Viiruse antikehade ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) koosseisus kasutatakse PCR-i diagnoosimiseks CVHC ja selle patogeeni genotüübi. See uurimus on üks uusimaid laborianalüüsi meetodeid. Selle CVHSi usaldusväärsus ületab 97%, mida peetakse teadusuuringute jaoks väga hea näitajaks.

CVHC jaoks on kolm vere PCR-analüüsi: kvalitatiivne, kvantitatiivne ja viiruse genotüpiseerimine. Viiruse esimene uuring (kvalitatiivne analüüs) tuvastab selle veres ja seetõttu kasutatakse seda ainult diagnoosimiseks.

Teine (kvantitatiivne) uuring määrab kehas viirusliku koormuse astme, seetõttu kasutatakse seda ravi efektiivsuse jälgimiseks.

Kolmas PCR (genotüpiseerimine) selgitab diagnoosi, määrates kindlaks viiruse genotüübi, mis on väga tähtis õige viirusevastase ravi määramiseks.

Polümeraasi ahelreaktsiooni tehnikaks on ensüümide kasutamine, mis mitmekordistavad patogeeni geneetilist materjali biomaterjalides. Sellise replikatsiooni käigus kuumutatakse verega toru mitu korda ja jahutatakse temperatuurini, mis on vajalik ensümaatilise reaktsiooni kiirendamiseks. Nende manipulatsioonide tulemusena suureneb viiruse genoomi kogus mitu korda, võimaldades selle tuvastamist isegi minimaalse koguse korral.

PCR-diagnostikal on palju teisi laboratoorseid analüüse:

  • kõrge tundlikkus - 97-98%;
  • tagatud analüütiline spetsiifilisus (näitab täpselt patogeeni, mida soovite leida, mitte selle seostatud tüvi);
  • läbiviimise kiirus (järelduse saamiseks kulub kuni 2 päeva).

Kolm tüüpi PCR-analüüse

Kvaliteetne PCR-analüüs määratakse kõigile patsientidele, kellel ELISA analüüs tuvastas HVGS-viiruse antikehad. Pärast kõrgekvaliteedilise PCR-i läbiviimist võib saada kaks vastusevarianti: "RNA tuvastatakse" või "RNA ei tuvastata". Viiruse minimaalse hulga tuvastamiseks veres on vaja katsesüsteeme, mille tundlikkus on vähemalt 50 RÜ / ml. Kui patsiendi veres on viiruse kontsentratsioon väiksem diagnoosikohust, võib uuringu tulemus olla vale negatiivne. Sellise diagnostilise vea vältimiseks peaksid laboratooriumid, kes tegelevad PCR-diagnostikaga, olema varustatud väga tundlike katsesüsteemidega. Näiteks laboris "Invitro" kasutatakse testid tundlikkusega 15 RÜ / ml. Laboratoorsed töötajad on kohustatud esitama patsientidele ja arstidele esimesel nõudmisel katsete tundlikkuse kohta teavet.

PCR kvantitatiivne analüüs määrab vireemia, see tähendab patogeeni kontsentratsiooni veres, viiruse koormuse. Selle uuringu tulemus on vastupidiselt kvaliteetsele PCR-i ekspressioonile numbritega, näiteks 2 x 10 x 6 IU / ml, mis tähendab 2 miljonit rahvusvahelist ühikut 1 ml veres. Mõned laborid kasutavad teist näitajat - koopiate arv / ml. Neid kahte näitajat on lihtne teisendada: üks rahvusvaheline ühik on võrdne 4 koopiat RNA-st. Seega, 2 x 10 x 6 IU / ml tähendab seda, et viiruse RNA-d 8 x 10 x 6 koopiat 1 ml-s, st 8 miljonit eksemplari 1 ml veres.

Genotüüpimine on ühe viiest genotüübi üheks määratluseks. Kliiniline pilt, maksa komplikatsioonide arengu kiirus ja patsiendi tulevase elu prognoos sõltuvad põhjustava toimega genotüübist. Viiruse genotüüp on juba juba diagnoosi staadiumis väga oluline, kuna ravimite kombinatsioon ja patsiendile määratud terapeutilise ravikuuri kestus sõltuvad selle õigsest määramisest.

Kuid isegi sellel näiliselt "täiuslikul" laboriuuringul on oma nõrkused:

  • uuring dubleerib kõigi patogeenide geneetiline materjal, isegi mitte elav, mis võib tulemust moonutada. Seetõttu PCR-i abil tõhususe jälgimiseks viiakse uuesti läbi analüüs mitte varem kui kaks kuud pärast eelmist, nii et surnud viirused võivad patsiendi kehast "lahkuda";
  • viirusgenoomi osa, mis määratakse kindlaks katsesüsteemide abil, võib teoreetiliselt esineda ka teistes viirustes või mikroorganismides, seega on võimalik valepositiivne reaktsioon;
  • viirused muteeruvad kiiresti. Mõnikord on viiruse mutatsiooni kiirus ja ulatus nii kõrge, et katse süsteem peatab nende genoomi püüdmise. Selle tulemusena on võimalik vale negatiivne tulemus.

Nende puudujääkide taseme määramiseks teevad PCR-diagnostika laborikatsete süsteemide tootjad pidevalt oma katseid, sealhulgas ristreaktsioone ja tundlikkust konkreetse viiruse genotüübi suhtes.

Kuidas kasutada C-hepatiidi PCR-testi?

Selleks, et PCR-uuring oleks usaldusväärne, tuleb rangelt järgida selle toimimise ettevalmistamise eeskirju:

  • uuringud viiakse läbi tühja kõhuga (glükoos, rasvad, mineraalid, mis sisenevad verest toidust, võivad mõjutada ensüümi reaktsiooni kiirust ja kvaliteeti);
  • viimane jahu ja analüüsimiseks võetud vereproovide vahe peaks olema vähemalt 8 tundi;
  • uuringu eelõhtul on keelatud võtta alkoholi ja tarbida rasvaste toitude, mille eliminatsiooniperiood on pikk;
  • päev enne laborisse lähetamist peaks vältima tugevat füüsilist ja emotsionaalset stressi;
  • kuni vereproovi võtmiseni ei soovitata suitsetada.

Valelike järelduste vältimiseks peab väidetav patsient tulema laborisse veidi varem kui veri võetakse. See võtab aega 15-20 minutit, kui inimene hinge kinni haarab, rahustab seda. Eksperimendi tulemus võib mõjutada adrenaliini, mis on pärast kiiret kõndimist veres.

Kui analüüsitavale patsiendile võetakse ravimeid, peaks ta sellest arstile teatama. On võimalik, et mõned neist tuleb mõnda aega keelduda (kui võimalik).

C-hepatiidi PCR analüüsi tulemus

Analüüsi laboratooriumi laboratooriumi tulemuste dekodeerimine. Dekodeerimine on normist saadud tulemuse kõrvalekalle. Indikaatorite määra määrab otseselt katsesüsteemi tootja, mida laboratoorium kasutab diagnoosimiseks. Seepärast ei ole üllatav, et mõnes laboris määratakse viiruskoormus IU / ml ja teistes eksemplarides / ml.

Pärast järelduse saamist on vaja seda õigesti tõlgendada. Uuringu tulemuste käsitlemist peaks läbi viima patsient, kes viibib hepatiit C, ainult pärast seda, kui patsient on objektiivne, instrumentaalne ja laboratoorsed. Arst saab saada piisava koguse andmeid saadud PCR tulemuste õigeks tõlgendamiseks.

Kvalitatiivse analüüsi hindamine ei põhjusta üldjuhul isegi patsientidel raskusi. Tulemuseks võib olla ainult üks: tuvastatud või mitte tuvastatud. Sellisel juhul on teine ​​neist norm.

Kvantitatiivse analüüsi näitajaid on raske tõlgendada. See näitab patsiendi viiruse koormust. Isegi hepatoloogide seas puudub üksmeel tuvastatud viiremia ravimiseks. Enamik arste soovib arvata, et tuleks kaaluda suuremat kogust üle 8 × 10 * 5 RÜ / ml. Koormus, mis on suurem kui 1 × 10 * 7 RÜ / ml, loetakse väga kõrgeks ja madala koormusega alla 4 × 10 * 5 RÜ / ml.

Viirusliku koormuse aste viitab viiruse virulentsusele (agressiivsusele): mida suurem on selle kogus veres, seda kiiremini võivad tekkida maksa tüsistused. Rasedate naise suur veres sisalduv viiruse kontsentratsioon suurendab tõenäosust, et see levib hemato-platsentaarbarjääri kaudu lootele. Viremia mõjutab ka ravi efektiivsust: vähesel arvul on ravi tõhusus kõrgem kui kõrgetel patsientidel.

Selleks, et olla kindel hepatiit C PCR-analüüsi täpsuse suhtes, on vaja eelistada ainult neid laboratooriume, kes on hästi töötanud. Sellisel juhul ei tohiks hinnakujunduspoliitika esmatähtsat rolli mängida.


Veel Artikleid Umbes Maksa

Hepatiit

Retsept: Küülik, mis küpsetatakse ahjus "sisse" varrukas - kartulitega

Siin oli mul jänku linnuke, ma pesin ja lõigati tükkideksNüüd valmistame marinaadi, vajame oliiviõli ja küüslaukuküüslaugu puhas ja peeneks režiim.
Hepatiit

Maksa portaali veen ja selle patoloogia

Maksa porruveen (IV, portugulaarveen) on suur pagasiruumi, mis võtab põrnast, soolest ja maost vere. Seejärel liigub ta maksa. Keha annab verd puhastamiseks ja see taas siseneb peavoolu.